朝藿定B的含量测定

来源：ChemicalBook

背景及概述[1]

朝藿定B(EpimedinB，缩写为EpiB)是淫羊藿提取物淫羊藿总黄酮中含量第二高的活性成分，文献显示在动物实验、细胞实验中，朝藿定B具有抗骨质疏松、骨保护作用。淫羊藿亦名仙灵脾，味甘气香，性温不寒，能益精气，具有补肾壮阳、止咳平喘、益气强心等功效，对防止衰老、健忘也有一定效果。临床中用于治疗神经衰弱、老年慢性支气管炎、肺气肿、冠心病、更年期高血压、血液病等。

含量测定[1]

(1)对照品溶液的制备：朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和淫羊藿苷各约5mg，精密称定，分别置于5ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，配制成4种对照品储备液。分别精密量取4种黄酮对照品储备液适量，置10ml量瓶中，加入甲醇稀释至刻度，摇匀，得混合对照品储备液。

(2)内标溶液的制备：取柚皮苷对照品约10mg，精密称定，置于10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，配制成内标储备液。精密量取内标储备液适量，置10ml量瓶中，加入乙腈:0.1％甲酸水溶液(35:65)稀释至刻度，摇匀，得μg/ml内标次级储备溶液。精密吸取内标次级储备液μl，置10ml量瓶中，加乙腈:0.1％甲酸水溶液(35:65)稀释至刻度，摇匀，得到内标工作液(2μg/ml)。

(3)供试品溶液制备：用乙腈:0.1％甲酸水溶液(35:65)稀释喘可治注射液0倍，精密量取0μl加内标工作液μl，涡旋40s，过0.22μm滤膜，取续滤液，得供试品溶液。

(4)检测条件：

高效液相色谱条件

色谱柱C×2.1mm,5.0μm、流动相乙腈:0.1％甲酸水溶液35:65、等度洗脱3.5min、进样量10μl、柱温40℃、流速0.22ml/min；

质谱条件

辅助气化电喷雾离子源ESI；多反应离子监测MRM模式负离子检测，监测离子对分别为：m/z.4→.2朝藿定A，m/z.5→.3朝藿定B，m/z.4→.4朝藿定C，m/z.3→.2淫羊藿苷，m/z.2→.1柚皮苷，辅助气化气流量：CC/min，雾化气流量：8L/min，气帘气流量：6L/min，离子源喷雾电压：-V，离子源雾化温度：℃。

分别取对照品、内标溶液和供试品溶液按照上述检测条件，测定朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和淫羊藿苷含量分别为66.11μg/ml，84.37μg/ml，.5μg/ml，.6μg/ml。#植物提取物#

参考文献

[1][中国发明,中国发明授权]CN.2一种喘可治注射液4种黄酮类有效成分检测方法